(2025年河北卷第23题)T-DNA插入失活是研究植物基因功能的常用方法,研究者将带有卡那霉素抗性基因的T-DNA插入拟南芥2号染色体的A基因内,使其突变为丧失功能的a基因,花粉中A基因功能的缺失会造成其不育。回答下列问题:
(1)基因内碱基的增添、缺失或_______都可导致基因突变。
(2)以Aa植株为____(填“父本”或“母本”)与野生型拟南芥杂交,F1中卡那霉素抗性植株的占比为0,其反交的F1中卡那霉素抗性植株的占比为_____。
(3)为进一步验证基因A的功能,将另一个A基因插入Aa植株的3号染色体。仅考虑基因A和a,该植株会产生_________种基因型的可育花粉,其中具有a基因的花粉占比为_____。该植株自交得到F1。利用图1所示引物P1和P2、P1和P3分别对F1进行PCR检测,电泳结果如图2所示。根据电泳结果F1植株分为Ⅰ型和Ⅱ型,其中Ⅰ型植株占比为_____。F1中没有检测到仅扩增出600bp条带的植株,其原因为________________。

(4)实验中还获得了一个E基因被T-DNA插入突变为e基因的植株,e基因纯合的种子不能正常发育而退化。为分析基因E/e和A/a在染色体上的位置关系,进行下列实验:
①利用基因型为AaEE和AAEe的植株进行杂交,筛选出基因型为_____的F1植株。
②选出的F1植株自交获得F2。不考虑其他突变,若F2植株中花粉和自交所结种子均发育正常的植株占比为0,E/e和A/a在染色体上的位置关系及染色体交换情况为____________;若两对基因位于非同源染色体,该类植株的占比为_____。除了上述两种占比,分析该类植株还可能的其他占比和原因:________。
【参考答案】
(1)替换
(2)父本 1/2
(3)3 1/3 2/3 仅含a基因的花粉不育(或“可育花粉一定含有A基因”或“F1没有基因型为aa的植株”或“F1植株必含有A基因”)
(4)①AaEe
②两对基因位于一对同源染色体,且没有交换(或“两对基因都位于2号染色体,且没有交换”) 1/6
该类植株占比还可能介于0-1/6之间,原因是两对基因位于一对同源染色体,且发生了交换
【考查内容】基因突变、分离定律和自由组合定律、配子不育、基因连锁、PCR检测
【试题解析】
一、审题,抓关键
(一)主题干

(二)第1小问

(三)第2小问

(四)第3小问

(五)第4小问

二、破题,找思路

三、解题,写过程
(一)第1小问
因为:基因突变是指DNA分子中发生碱基的替换、增添或缺失,而引起的基因碱基序列的改变
所以:结合本小问题干信息,本小问应该填“替换”
(二)第2小问

(三)第3小问
1.第1空和第2空

2.第3空和第4空

(四)第4小问
1.问题①

2.问题②
因为:基因E/e和A/a在染色体上的位置关系有两种情况
情况一:基因E/e和A/a在一对同源染色体上
情况二:基因E/e和A/a在两对同源染色体上
所以:F1植株AaEe自交结果如下

(1)第1空和第2空

(2)第3空

【易错提醒】
1.误认为a花粉不育是指含a就死,准确来说是不含正常A基因的花粉不育。若花粉中同时含a和A,仍可育。
2.忽略卡那霉素抗性是a的标记,
3.第(4)问只考虑自由组合,忽略连锁。两对基因位于一对同源染色体上,需考虑连锁(无交换/有交换两种情况)。

【往期推荐】
慢慢解真题|遗传基本规律(10):X染色体倒位与PCR诊断(2025年河北卷)