高考真题 | 每日一题(272)

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质粒K中含有β-半乳糖苷酶基因,将该质粒导入大肠杆菌细胞后,其编码的酶可分解X-gal,产生蓝色物质,进而形成蓝色菌落,如图所示。科研小组以该质粒作为载体,采用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达。下列叙述错误的是( )

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A.使用氯化钙处理大肠杆菌以提高转化效率,可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数

B.如果筛选平板中仅含卡那霉素,生长出的白色菌落不可判定为含目的基因的菌株

C.因质粒K中含两个标记基因,筛选平板中长出的白色菌落即为表达目标蛋白的菌株

D.若筛选平板中蓝色菌落偏多,原因可能是质粒K经酶切后自身环化并导入了大肠杆菌

参考答案

C

解析

氯化钙处理大肠杆菌能增强其对质粒的摄取能力,使更多大肠杆菌获得质粒,提高其转化效率。若获得空载质粒(β-半乳糖苷酶基因未被破坏),则会在筛选平板上形成蓝色菌落;若获得重组质粒(人源干扰素基因的插入会破坏β-半乳糖苷酶基因),则会在筛选平板上形成白色菌落。因此,使用氯化钙处理可增加筛选平板上白色和蓝色菌落数,A正确;若筛选平板中仅含卡那霉素,能在上面形成白色菌落的菌可能是导入目的基因的大肠杆菌,也可能是对卡那霉素有抗性的杂菌,故B正确;筛选平板中长出白色菌落,只能说明菌株中导入了β-半乳糖苷酶基因被破坏的质粒,但该质粒中是否正确连接目的基因,且目的基因是否转录、翻译,是否表达出目标蛋白未知,还需要进一步鉴定,C错误;质粒K经过BamHI酶切后,若未与目的基因连接,其可能会自身环化重新形成完整质粒,导入大肠杆菌后,β-半乳糖苷酶基因正常表达,分解X-gal产生蓝色物质,形成蓝色菌落,故D正确。
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