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安徽省马鞍山市2026年高三第二次教学质量监测
生物学答案及解析
1.【答案】A
【解析】孟德尔研究遗传定律、摩尔根证明基因位于染色体上均采用假说-演绎法，但萨顿是通过类比推理法提出基因在染色体上的假说，未使用假说-演绎法，①错误；分离各类细胞器采用差速离心法，但探究DNA半保留复制方式采用的是密度梯度离心法，②错误；物理模型是以实物或图画形式直观呈现认识对象的特征，制作真核细胞三维结构模型属于建构物理模型，但拍摄的真核细胞电镜照片是细胞结构的真实影像记录，不属于模型建构，③错误；探究培养液中酵母菌种群数量变化，采用抽样检测法对酵母菌计数，同时通过绘制种群数量增长曲线等方式建构数学模型研究其数量变化规律，④正确；鲁宾和卡门的光合作用实验采用同位素标记法，但标记所用的18O是稳定同位素，不具有放射性，不属于放射性同位素标记法，⑤错误。综上正确的叙述仅1项，A正确。
2.【答案】C
【解析】GPCR56属于膜蛋白，膜蛋白由核糖体合成后，需要经过内质网的加工、折叠，再通过高尔基体的进一步修饰、分类和运输才能定位到细胞膜上，故GPCR56的合成和加工过程需要内质网和高尔基体参与，A错误；题干明确说明黏附类GPCR激活后通过迁移体转移至邻近接收细胞，并非通过血液运输至全身发挥作用，B错误；细胞骨架参与细胞内物质运输、囊泡的形成和转运等生命活动，迁移体属于胞外囊泡，其形成过程依赖细胞骨架的支撑和运输，因此抑制细胞骨架的组装会降低迁移体的形成效率，C正确；激素信号的传递模式为信号分子（激素）→靶细胞膜受体→胞内信号；而GPCR56囊泡传递的是膜受体本身，并非信号分子，二者传递模式存在本质差异，D错误。
3.【答案】B
【解析】溶酶体是储存水解酶的细胞器，并不合成水解酶，水解酶的合成场所是核糖体，A错误；缺氧时HIF1α激活p21、p27，而p21、p27会抑制细胞周期（抑制2N→4N的进程），会延长细胞周期；同时HIF1α作为缺氧诱导因子，会启动与低氧适应相关基因的转录，B正确；图中“4N→2N”是细胞分裂的末期（核DNA数从4N变为2N，对应细胞一分为二），着丝粒分裂发生在后期（4N→4N阶段），末期发生染色体解螺旋等变化，C错误；低浓度ATP通过激活AMPK来抑制细胞周期，若抑制ATP的合成，ATP浓度降低，不会解除高浓度ATP对细胞周期的抑制，反而会因能量不足影响细胞周期，D错误。
4.【答案】D
【解析】生态位包括物种所处的空间位置、占用资源的种类、活动时间以及与其他物种的种间关系等多个维度，仅觅食生境相同不能说明生态位完全一样，A错误；资源丰富时，生态位重叠的物种可各自获取充足的资源，无需竞争相同的有限资源，种间竞争强度会降低而非增大，B错误；特化种只能利用特定资源、适应特定环境，环境剧烈变化时其难以找到适配的生存资源，泛化种可利用多种资源，比特化种更易适应环境变化，C错误；泛化种需要适应多种环境、利用多种资源，种群内的性状多样性更丰富，对应的遗传多样性（基因多样性）一般高于仅适应特定环境的特化种，D正确。
5.【答案】C
【解析】群落的季节性是指群落的外貌和结构随季节更替发生有规律的变化，该湖泊的转变是人类干扰下的群落演替过程，不属于群落的季节性，A错误；草食性鱼类以生产者（沉水植物）为食，属于初级消费者；食鱼性鱼类可捕食多种鱼类，若其捕食的是次级消费者（如滤食性鱼类捕食浮游动物时属于次级消费者），则食鱼性鱼类属于三级及更高营养级，并非一定是次级消费者，B错误；浮游生物世代周期短、繁殖周转速度快，某一时刻的现存生物量可能出现低于滤食性鱼类生物量的情况，因此浮游生物的生物量可能低于滤食性鱼类，C正确；区分不同群落的重要特征是群落的物种组成，丰富度仅指群落中物种数目的多少，不能作为区分不同群落的核心特征，D错误。
6.【答案】A
【解析】该实验只能说明受电击海蜗牛的腹部神经元RNA与防御记忆的形成存在关联，但RNA可能通过指导合成蛋白质等途径间接发挥作用，无法证明RNA直接决定记忆形成，A正确；该实验仅能证明睾丸与公鸡雄性性征维持有关，未排除睾丸内其他成分的作用，没有直接验证雄激素的功能，不能得出雄性性征维持与雄激素有关的结论，B错误；小肠黏膜过滤液中含有包括促胰液素在内的多种物质，血压下降可能是其他物质作用的结果，无法证明是促胰液素具有降血压作用，C错误；该条件反射建立过程中，食物是非条件刺激，铃声最初是无关刺激，经多次和食物结合后才转化为条件刺激，并非从非条件刺激转化而来，D错误。
7.【答案】D
【解析】初期T4水平高，甲状腺激素能提高代谢、增加产热、提高神经兴奋性，因此会出现亢奋多汗；中期T4水平降低，甲状腺激素不足会转怕冷乏力；后期T4恢复正常，症状消退，A正确；题目明确说明“亚急性甲状腺炎患者由于甲状腺滤泡破裂，导致滤泡中合成和储存的甲状腺激素（T4）大量释放进入血液”，所以2个月内T4水平高于正常范围是因为滤泡破裂，B正确；5个月时甲状腺摄碘率较低，无法合成足够的T4，所以T4水平低于正常范围，C正确；7个月后T4已经恢复到正常范围附近，此时T4不会通过负反馈抑制下丘脑和垂体分泌相关激素导致摄碘率下降；摄碘率下降是因为前期滤泡破裂、激素释放后，甲状腺合成功能尚未完全恢复或炎症影响，D错误。
8.【答案】D
【解析】破伤风杆菌侵入机体后，细胞免疫仅能裂解被病原体侵染的靶细胞，将破伤风杆菌释放到内环境中，释放的病原体还需要体液免疫产生的抗体结合，最终被吞噬细胞吞噬消化，因此仅靠细胞免疫无法彻底清除病原体，A正确；皮肤和黏膜是保卫人体的第一道防线，完好皮肤可以阻挡破伤风杆菌侵入，无暴露时不存在感染风险，不需要特殊处理，B正确；轻度暴露感染风险低，有疫苗接种史且在有效保护期内的个体体内存在相应的记忆细胞和抗体，可快速启动免疫反应清除病原体，仅需处理伤口即可，C正确；严重暴露且疫苗接种史不详者感染破伤风的风险很高，接种疫苗属于免疫预防，机体产生足量抗体需要一定时间，无法快速应对可能的感染，还需要注射破伤风抗毒素直接提供抗体中和毒素，因此需要①②③共同处理，D错误。
9.【答案】B
【解析】光敏色素是光信号受体，光在此过程中是作为信号分子而非能量被光敏色素感知，之后通过信号转导调控核内基因表达，A错误；黄瓜花的性别分化受激素比例调控，脱落酸与赤霉素的比值较低时，赤霉素相对含量更高，有利于分化形成雄花，比值较高时则有利于雌花分化，B正确；脱落酸属于植物激素，仅能传递调节代谢的信号，不具备催化功能，催化叶绿素分解的物质是相应的酶，C错误；生长素的合成不需要单侧光刺激，胚芽鞘尖端在有光、无光条件下均可产生生长素，单侧光的作用是引起生长素在尖端的横向运输，导致其分布不均匀，D错误。
10.【答案】A
【解析】由题意可知，A-XB-为红花，aa--为白花，A-XbXb（XbY）为粉色花。亲本基因型为AaXBXb与AaXBY，Aa×Aa得A-：aa=3:1，AaXBXb×AaXBY得XbY占1/4，因此AaXBXb与AaXBY的亲本杂交，子代开粉花的个体占3/4×1/4=3/16，A错误；AaXBXb与AaXBY的亲本杂交，子代中白花个体的基因型及比例为aaXBXB：aaXBXb：aaXBY：aaXbY=1：1：1：1，因此开白花的个体中纯合子占3/4，B正确；AaXBXb与AaXBY的亲本杂交，子代中红花个体的基因型及比例为AAXBXB：AaXBXB：AAXBXb：AaXBXb：AAXBY：AaXBY=1:2:1:2:1:2，对于A/a基因来说，AA：Aa=1:2，自由交配后A-为8/9、aa为1/9；对于B/b基因来说，雌株中XBXB：XBXb=1：1，雄株为XBY，自由交配子代中XbY为1/2×1/4（XbY），因此AaXBXb与AaXBY的亲本杂交子代中开红花的个体相互交配，后代开粉色花（A-XbY）的个体所占的比例为8/9×1/8=1/9，C正确；亲本的基因型为AaXBXb、AaXBY，可能是父本在减数分裂Ⅰ时XY染色体未分离，形成AXBY和a的的精子，a的雄配子与aXb的雌配子结合会形成aaXb的个体，D正确。
11.【答案】C
【解析】结肠癌的形成是原癌基因和抑癌基因多次突变的结果，不是仅正常基因突变为原癌基因，A错误；Tiam1蛋白是基因经转录和翻译产生的，但miR-433-3p是微小RNA，只由基因转录产生，不进行翻译，B错误；丁组加入的是“非miR-433-3p微小RNA”，属于对照实验，目的是排除无关RNA对实验结果的影响，C正确；从图中看，蛇床子素浓度升高时，Tiam1蛋白相对表达量降低、miR-433-3p相对表达量升高，但不能直接证明二者存在因果关系，无法得出“抑制Tiam1蛋白合成来促进miR-433-3p形成”的结论，D错误。
12.【答案】B
【解析】选择系数s越高说明基因型不利于生存的程度越高，喷洒杀虫剂后bb的s值为0，说明其适应能力最强，A错误；喷洒前BB、Bb、bb的数量比为1：2：1，基因型的存活比例为1-s，因此存活BB数量为1×(1-0.7)=0.3，存活Bb数量为2×(1-0.4)=1.2，存活bb数量为1×(1-0)=1，三者比例化简为3：12：10，B正确；变异是不定向的，抗药性变异在使用杀虫剂前就已经产生，杀虫剂仅对已有的抗药性变异进行定向选择，不会诱导产生抗药性变异，C错误；杀虫剂直接对种群的表现型进行选择，通过筛选存活个体间接改变种群的基因频率，D错误。
13.【答案】B
【解析】该实验中选用的敏感指示菌不一定为大肠杆菌，因为噬菌体具有专一性，针对的敏感指示菌需是该噬菌体所专性侵染的细菌，不一定是大肠杆菌，A错误；上层培养基需要支持指示菌生长，同时让噬菌体侵染、裂解细菌形成噬菌斑；底层培养基作为支撑层，也需要提供相同的营养，保证指示菌在整个平板上正常生长，才能形成清晰的噬菌斑。因此上下层营养成分必须一致，这样才能保证敏感指示菌在上下层培养基中都能正常生长，B正确；上层培养基琼脂浓度过低会导致上层平板不能凝固，无法形成稳定的平板用于计数，并非浓度越低越利于计数，C错误；对生产空间灭菌不能彻底杜绝噬菌体污染，因为噬菌体分布广泛，且可能存在于空气、设备等多种环境中，灭菌后仍可能有噬菌体残留，D错误。
14.【答案】BD
【解析】动物细胞培养时添加5%CO2的作用是维持培养液的pH，细胞呼吸供能依赖细胞自身氧化分解有机物，CO2不具备刺激细胞呼吸供能的作用，A错误；逐步提升摇床转速可促进培养液流动，既可以避免细胞沉降贴壁，还能增加细胞与培养液的接触程度，便于细胞获取营养、排出代谢废物，B正确；无限增殖是发生癌变的细胞才具备的特征，悬浮生长的CHO细胞未发生癌变，不能无限增殖，且该细胞沉降后仍可贴壁生长，仍存在接触抑制特性，C错误；由题干可知，培养过程从低血清培养液更换为无血清培养液后才筛选得到悬浮生长的CHO细胞，可推测血清中可能含有促进细胞贴壁、不利于细胞悬浮培养的成分，D正确。
15.【答案】A
【解析】采集的卵母细胞需要培养至减数第二次分裂中期才具备受精能力，精子需要经过获能处理后才能完成受精过程，因此二者不能直接用于体外受精，A正确；胚胎移植前，注射促性腺激素的目的是对供体母牛进行超数排卵处理，受体母牛仅需进行同期发情处理，无需注射促性腺激素，B错误；胚胎内部出现含液体的囊胚腔是囊胚阶段的特征，桑葚胚阶段为致密的细胞团，尚未形成腔隙，C错误；胚胎发育到囊胚阶段后期会发生透明带破裂（孵化），后续的发育过程脱离透明带，并非全过程都在透明带内完成，D错误。
16.【答案】
（1）PSⅡ（光系统Ⅱ） ATP和NADPH
（2）非气孔因素 红叶紫苏的Fv/Fm显著高于绿叶紫苏，表明其PSⅡ结构更稳定，光化学效率更高；红叶紫苏的SOD活性显著升高，能更有效地清除活性氧，减轻氧化损伤；红叶紫苏的花青素含量显著升高，能更有效地清除活性氧，减轻氧化损伤或红叶紫苏在干旱下积累了较多的花青素和具有更高的SOD活性，能有效减轻氧化损伤，保护光合机构
（3）选取生长状况一致且健康的红叶紫苏植株，随机均分为两组；甲组为对照组，喷施等量蒸馏水，乙组为实验组，喷施等量花青素合成抑制剂；将两组植株置于相同且适宜的干旱环境下培养，在相同时间点测定并比较两组紫苏叶片的SOD活性 甲组SOD活性显著高于乙组
（4）适时灌溉，避免农作物出现长时间干旱；筛选或培育富含花青素、抗氧化能力强的作物品种；利用外源物质诱导花青紧积累，提升作物抗旱
【解析】
（1）在光合作用中，水光解发生在类囊体膜上，所以图中能完成水光解的具体结构是PSⅡ（光系统Ⅱ）。光反应阶段，PSI和PSII吸收的光能最终转化并储存在ATP和NADPH中。
（2）分析表格数据，绿叶紫苏在干旱条件下胞间CO2浓度从280变为315，变化不大，而净光合速率大幅下降，所以干旱胁迫下绿叶紫苏光合速率下降的主要限制因素是非气孔因素。相对于绿叶紫苏，红叶紫苏净光合速率下降幅度更小，直接原因有：红叶紫苏的Fv/Fm显著高于绿叶紫苏，表明其PSⅡ结构更稳定，光化学效率更高；红叶紫苏的SOD活性显著升高，能更有效地清除活性氧，减轻氧化损伤；红叶紫苏的花青素含量显著升高，能更有效地清除活性氧，减轻氧化损伤或红叶紫苏在干旱下积累了较多的花青素和具有更高的SOD活性，能有效减轻氧化损伤，保护光合机构。
（3）实验思路：选取生长状况一致且健康的红叶紫苏植株，随机均分为两组；甲组为对照组，喷施等量蒸馏水，乙组为实验组，喷施等量花青素合成抑制剂；将两组植株置于相同且适宜的干旱环境下培养，在相同时间点测定并比较两组紫苏叶片的SOD活性。预期结果：甲组SOD活性显著高于乙组。
（4）以上研究对农业生产的启示是在农业生产中，可以适时灌溉，避免农作物出现长时间干旱。筛选或培育富含花青素、抗氧化能力强的作物品种。利用外源物质诱导花青紧积累，提升作物抗旱性。
17.【答案】
（1）避免重复计数，保证数据的独立性与准确性 低出生率、高死亡率
（2）在不改变活动时间的前提下，通过空间上的分离降低与人类的直接冲突和干扰，减少人为活动对其觅食、生存的影响，从而实现共存
（3）整体 减少 “天窗” 设置过多，人类活动区域扩大，会增加对黄腹角雉的人为干扰（如噪音、惊扰、栖息地破坏），导致黄腹角雉的栖息地碎片化、隐蔽场所减少，生存环境恶化，出生率下降、死亡率上升，种群数量减少
【解析】
（1）红外相机监测的核心是估算种群数量（种群密度）。如果不剔除短时间内同一机位的连续重复拍摄，同一只黄腹角雉会被多次计数，导致统计的个体数远高于实际值，最终使种群密度估算偏高。因此该操作的本质是避免重复计数，保证数据的独立性与准确性。种群密度的直接影响因素是出生率、死亡率、迁入率、迁出率；而种群特征中的年龄结构、性别比例等会间接影响这些因素。黄腹角雉种群密度低，从种群特征角度，核心原因是低出生率、高死亡率导致单位空间内的个体数量少。
（2）活动时间与人类重叠，说明黄腹角雉没有通过改变活动节律来避开人类；“不同位”：活动空间与人类分离，人类在步道附近，黄腹角雉在林下隐蔽处，这种策略的意义是：在不改变活动时间的前提下，通过空间上的分离降低与人类的直接冲突和干扰，减少人为活动对其觅食、生存的影响，从而实现共存。
（3）生态工程的核心原理中，整体原理强调社会—经济—自然复合系统的统一，“国家公园内允许人类社区发展的区域”，就是兼顾了人类社会需求与自然保护需求，不是单纯封闭保护，而是统筹人与自然的关系，因此遵循整体原理。黄腹角雉是对人为干扰敏感的物种，“天窗” 过多意味着人类活动的范围和强度增大： 栖息地被分割、破坏，隐蔽觅食和繁殖的场所减少； 人为活动带来的噪音、惊扰会影响其觅食、繁殖行为，导致繁殖成功率下降； 人为干扰还可能增加黄腹角雉的应激反应，降低其免疫力，死亡率上升，因此种群数量大概率会减少。
18.【答案】
（1）大脑皮层 神经递质
（2）实验分组、控制变量 间歇性禁食（IF）
（3）甲组 < 丙组 < 乙组 甲组 > 丙组 > 乙组
（4）间歇性禁食（IF）可降低AD小鼠的肠道屏障通透性，减少脂多糖（LPS）进入血液，减轻血脑屏障损伤，减少脑内β-淀粉样蛋白沉积，从而改善学习和记忆能力
【解析】
（1）学习和记忆的中枢主要位于大脑皮层，AD患者β-淀粉样蛋白沉积会损伤大脑皮层神经元，因此推测大脑皮层受损。学习和记忆涉及脑内神经递质的作用（如乙酰胆碱、谷氨酸等），同时也需要新突触的建立和某些蛋白质的合成。
（2）实验的目的是探究间歇性禁食（IF）是否能改善AD模型小鼠的学习与记忆能力，因此这部分内容为实验分组、变量控制(分组与处理)。丙组处理方式：对AD模型小鼠实施间歇性禁食（如隔日禁食或每日限时进食），以与乙组（正常进食AD小鼠）形成干预对照。
（3）水迷宫实验的预期结果（验证IF改善学习记忆）：学习记忆能力越强的小鼠，找到隐藏平台的速度越快，逃避潜伏时间越短；无平台期穿越原平台位置的次数越多（说明对平台位置的记忆越牢固）。逃避潜伏时间：甲组 < 丙组 < 乙组（正常小鼠最快，IF处理的AD小鼠次之，未处理的AD小鼠最慢）；穿越平台次数：甲组 > 丙组 > 乙组（正常小鼠最多，IF处理的AD小鼠次之，未处理的AD小鼠最少）
（4）尿中L/M 比值反映肠道屏障通透性：比值越高，说明大分子乳果糖越容易透过，肠道屏障通透性越大，损伤越严重。 血清中LPS（脂多糖）含量越高，说明肠道屏障破坏，促炎分子进入血液越多，对脑的损伤越强。数据对比： 甲组（正常小鼠）：L/M比值0.044，LPS1.20 ng/ml（肠道屏障正常，LPS 水平低），乙组（AD模型+正常进食）：L/M比值0.161，LPS2.95 ng/ml（肠道屏障通透性大，LPS 水平高），丙组（AD 模型+IF 处理）：L/M比值0.084，LPS1.90ng/ml（L/M和LPS均显著低于乙组，接近甲组）。因此，IF 的作用机制是：间歇性禁食（IF）可以降低AD小鼠的肠道屏障通透性，减少脂多糖（LPS）等促炎分子进入血液，从而减轻血脑屏障的破坏，减少脑内 β- 淀粉样蛋白的沉积，改善学习和记忆能力。
19.【答案】
（1）环境因素（环境）
（2）不能 控制叶形的两对基因位于两对同源染色体上，遵循基因的自由组合定律
（3）2 1/2 基因M应插入在与A基因（控制椭圆叶）紧密连锁的位置，即标注在左侧同源染色体的A基因座位上（或紧邻A基因的同一条染色体上）。
【解析】
（1）可遗传变异由遗传物质改变引起，能遗传给后代；不可遗传变异由环境因素引起，遗传物质未改变，不能遗传给后代。若心形叶植株自交，子代均不出现心形叶，说明该变异不能遗传，是由环境因素（不可遗传的变异）引起。
（2）若为原基因位点突变（位于一对同源染色体上），心形叶由A/a突变产生新等位基因（如a'），设显隐性为A（椭圆叶）>a'（心形叶）>a（长条形叶）。 实验一：AA（椭圆叶）×aa（长条形叶）→Aa（全椭圆叶），自交→A_：aa=3：1（椭圆叶：长条形叶=3：1），符合； 实验二：AA（椭圆叶）×a'a'（心形叶）→Aa'（全椭圆叶），自交→A_：a'a'=3：1（椭圆叶：心形叶=3：1），符合。 若为新基因位点突变（位于两对同源染色体上）：心形叶由新基因B/b控制（bb表现心形叶，B_不影响原叶形），椭圆叶为AABB，心形叶为AAbb。 实验一：AABB×aaBB→AaBB（全椭圆叶），自交→A_BB：aaBB=3：1（椭圆叶：长条形叶=3：1），符合； 实验二：AABB×AAbb→AABb（全椭圆叶），自交→AAB_：AAbb=3：1（椭圆叶：心形叶=3：1），也符合。 因此，仅实验一、二不能确定突变类型。实验三：长条形叶×心形叶→全为椭圆叶，自交后代表型比为椭圆叶：长条形叶：心形叶=9：4：3，这是9：3：3：1的变形，说明控制叶形的两对基因（A/a与B/b）位于两对同源染色体上，遵循基因的自由组合定律且椭圆叶为A_B_，长条形叶为aa__，心形叶为A_bb。长条形叶亲本基因型为aaBB，心形叶亲本基因型为AAbb，杂交得F1为AaBb（全椭圆叶），F1自交，F2基因型及表型：A_B_（椭圆叶，9/16）、aa__（长条形叶，4/16）、A_bb（心形叶，3/16），最终表型比为9：4：3。
（3）将甲与野生型白花长条形植株杂交，子代全部是红花椭圆叶可知，红花对白花为显性，椭圆叶对长条形叶为显性，所以野生型红花椭圆叶基因型为AADD，白花长条形叶基因型为aadd。转基因雄性不育株甲（含M基因）与aadd杂交，F1全为红花椭圆叶（AaDd），说明甲为AADD（插入M）。 F1中雄性不育株（含M）测交（×aadd）得F2，电泳条带中：有A条带=含A，有a条带=含a；有D条带=含D，有d条带=含d；雄性不育株必含M基因，因此条带对应基因型。从电泳图看，类型I的F2中有两种基因型AaDd和Aadd，即红花椭圆叶和红花长条形叶，即其雄性不育株的表型有2种。所有的不育植株都含A（红花），说明M与A基因在同一条染色体上，叶形出现椭圆叶和长条形叶两种，说明D/d与A/a独立遗传。F1雄性不育植株基因型为AaDd，产生的配子为A(M)D：A(M)d：aD：ad=1：1：1：1，aadd只产生一种配子ad，所以F2代基因型为A(M)aDd（不育），A(M)add（不育），aaDd（可育），aadd（可育），雄性不育植株占1/2。从电泳图看，类型 Ⅲ中A、a、D、d条带均存在，且F2中雄性不育株只有一种类型（AaDd），ad是aadd提供的配子，AD是F1提供的配子，说明M基因与A、D在同一条染色体上，ad在同源染色体上，所以基因M应插入在与A基因（控制椭圆叶）紧密连锁的位置，即标注在左侧同源染色体的A基因座位上（或紧邻A基因的同一条染色体上）。
20.【答案】
（1）变性（95℃左右）、复性（退火，55℃左右）、延伸（72℃左右）
（2）HindⅢ、EcoRⅠ （3）白色
（4）同向 植物 Cre 酶基因需要在植物细胞中表达，只有植物特异性启动子才能被植物细胞的 RNA 聚合酶识别，启动 Cre 酶基因的转录；农杆菌特异性启动子无法在植物细胞中发挥作用
【解析】
（1）PCR 的每一轮循环都由这三步组成，目的是指数扩增目的基因： 变性：高温（约 95℃）下，双链 DNA 解旋为单链，成为扩增的模板。 复性（退火）：温度降低（约 55℃），引物与单链模板 DNA 的互补序列特异性结合。 延伸：在 Taq 酶（热稳定 DNA 聚合酶）的作用下，以 dNTP 为原料，从引物的 3' 端开始合成新的 DNA 链（约 72℃）。
（2）同时XhoⅠ 位点在 SHP基因内部，不能用 XhoⅠ 切目的基因，酶切位点 1 对应HindⅢ，位点 2 对应EcoRⅠ，这样才能让 SHP 基因反向插入 T-DNA 中，实现反义表达。
（3）当SHP基因成功插入Ti质粒的 T-DNA 区域时，会破坏LacZ基因的结构，导致其无法编码有功能的β-半乳糖苷酶。 含重组质粒的农杆菌在添加了 X-gal 的培养基上，无法分解 X-gal，因此菌落为白色。因此，要筛选出含重组表达载体的受体细胞，应挑选白色菌落。
（4）Cre/LoxP 系统的核心规则：只有两个同向的 LoxP 位点，才会被 Cre 酶识别并切除中间的序列；若为反向 LoxP 位点，中间的序列会被倒位，而不是切除。因此，要敲除标记基因，必须使用同向的 LoxP 位点。启动子具有物种 / 细胞特异性： 启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的位点，不同物种的 RNA 聚合酶只能识别对应的启动子。 农杆菌中的启动子只能被农杆菌的 RNA 聚合酶识别，无法在植物细胞中启动转录；而植物特异性启动子可以被植物细胞的 RNA 聚合酶识别，使 Cre 酶基因在植物细胞中表达，从而切除标记基因。 逻辑顺序：农杆菌转化→T-DNA 整合到植物基因组→需要 Cre 酶在植物细胞中表达→因此必须用植物特异性启动子。
