1.(2025·河北卷，22节选)PCR中使用的DNA聚合酶需耐高温，其原因为__________________________________________________。
2.(2024·全国甲卷，38节选)构建重组质粒时，与用酶a单酶切相比，用酶a和酶b双酶切的优点体现在______________________________________________
_______________________________(答出两点即可)。
3.(2024·甘肃卷，21节选)源于细菌的纤维素酶是一种复合酶，能降解纤维素。为了提高纤维素酶的降解效率，某课题组通过筛选高产纤维素酶菌株，克隆表达降解纤维素的三种酶。
(1)采用以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基筛选菌株X，能起到筛选作用的原因是_____________________________________________________。
(2)大肠杆菌作为受体细胞的优点有______________________________。
4.(2024·黑吉辽卷，25节选)从苏云金杆菌提取DNA时，需加入蛋白酶，其作用是____________________________________________________。
提取过程中加入体积分数为95%的预冷酒精，其目的是____________。
5.(2023·全国甲卷，38节选)(1)重组表达载体中通常含有抗生素抗性基因，抗生素抗性基因的作用是____________________________________。
(2)若要通过实验检测目的基因在酵母细胞中是否表达出目的蛋白，请简要写出实验思路。
_________________________________________________________________
_________________________________________________________。
6.(2023·湖北卷，22节选)某病毒对动物养殖业危害十分严重。我国学者拟以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，以期快速检测该病毒，其主要技术路线如图所示。
回答下列问题：
(1)在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基(如HAT培养基)，该培养基对和生长具有抑制作用。
(2)单克隆抗体筛选中，将抗体与该病毒外壳蛋白进行杂交，其目的是_____________________________________________________________。
7.(2022·全国乙卷，38节选)常见的病毒疫苗有灭活疫苗、蛋白疫苗和重组疫苗等。已知某种病毒的特异性蛋白S(具有抗原性)的编码序列(目的基因)。为了制备蛋白疫苗，可以通过基因工程技术获得大量蛋白S。基因工程的基本操作流程是__________________________________________________________。
8.(2021·全国甲卷，38节选)PCR技术可用于临床的病原菌检测。PCR(多聚酶链式反应)技术是指。
9.(2021·全国乙卷，38节选)表达载体含有启动子，启动子是指____________。
答案：
1.PCR过程变性、延伸需要温度较高，一般的DNA聚合酶在高温下会变性失活
2．保证目的基因连接方向正确，防止目的基因和质粒的自身环化
3．(1)只有能利用羧甲基纤维素钠的微生物才能生长、繁殖 (2)繁殖快、结构简单、遗传物质少、容易培养等
4．水解蛋白质，使得DNA与蛋白质分离 溶解蛋白质等物质，析出不溶于酒精的DNA
5．(1)用于筛选含有重组表达载体的细胞 (2)从酵母细胞中提取蛋白质，再用相应的抗体进行抗原—抗体杂交，检测是否出现杂交带
6．(1)骨髓瘤细胞 自身融合的骨髓瘤细胞 (2)检测抗体特异性
7．获取目的基因→构建基因表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
8．一种在生物体外快速扩增特定DNA片段的技术
9．RNA聚合酶识别、结合和驱动转录的一段DNA序列
