考点01 基因工程的基本工具 考点02基因工程的基本操作程序 考点03基因工程的应用 考点04 蛋白质工程 考点05生物技术的安全与伦理问题 1．(高二下·宁夏固原·期末)基因工程技术的实施必须具备的四个必要条件是（ ） A．目的基因、DNA聚合酶、载体、受体细胞 B．工具酶、目的基因、载体、受体细胞 C．模板DNA、信使RNA、质粒、标记基因 D．重组DNA、RNA聚合酶、限制性内切酶、DNA连接酶 2．(高二下·甘肃临夏州·期末)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，下列关于操作流程的叙述错误的是（ ） A．DNA溶于酒精，某些蛋白质不溶于酒精，可利用这一原理初步分离DNA与蛋白质 B．通常不选用哺乳动物血液作为实验材料，因为哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核 C．将洋葱切碎、研磨、过滤，滤液静置于4℃冰箱中几分钟后，DNA存在于上清液中 D．可利用二苯胺试剂鉴定丝状物的主要成分——DNA，沸水浴后观察是否出现蓝色 3．(高二下·新疆乌鲁木齐101中学·期末)限制酶的作用特点是（ ） A．识别特定RNA序列 B．切割双链DNA中特定磷酸二酯键 C．催化DNA双链随机断裂 D．连接DNA片段 4．(高二下·吉林吉林永吉实验高级中学等校·期末)下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A．可选择新鲜洋葱、香蕉、菜花或猪肝等作为实验材料 B．在4℃冰箱中进行过滤液沉淀是为了防止DNA被降解 C．加入预冷酒精后需用玻璃棒沿一个方向搅拌滤液 D．鉴定时将丝状物直接加入二苯胺试剂中并沸水加热 5．(高二下·甘肃武威·期末)用A和B两种限制酶同时和分别处理某DNA分子，酶切位点及酶切产物的电泳鉴定结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．图中X代表的碱基对数为4500bp B．图中Y是限制酶A的酶切位点 C．图乙中①代表限制酶A，②代表限制酶B D．用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段得到4个末端 6．(高二下·陕西渭南临渭区·期末)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”及“DNA片段的扩增与电泳鉴定”实验的叙述正确的是（ ） A．DNA溶于酒精，某些蛋白质不溶于酒精，可利用这一原理初步分离DNA与蛋白质 B．向含DNA的试管中加入二苯胺试剂，混合后即可比较观察颜色变化 C．DNA分子在凝胶中的迁移速率与DNA分子大小和构象有关，与凝胶浓度无关 D．电泳凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的紫外灯下被检测出来 7．(高二下·甘肃武威·期末)在利用洋葱进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关操作正确的是（ ） A．利用定性滤纸进行过滤，以去除杂质，提高DNA的含量和纯度 B．研磨洋葱时，加入适量的研磨液瓦解细胞膜，充分释放核DNA C．该实验利用了DNA可溶于酒精而某些蛋白质不溶于酒精的原理 D．将白色丝状物加入4mL二苯胺试剂中沸水浴，以利于发生颜色反应 8．(高二下·青海西宁城北区青海三江源民族中学·期末)下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ） A．“分子缝合针”是限制性内切核酸酶 B．DNA连接酶和载体是构建重组质粒必需的工具酶 C．限制酶和DNA连接酶的作用都与磷酸二酯键有关 D．转基因烟草操作过程中常用烟草花叶病毒作载体 9．(高二下·陕西西安新城区·期末)限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶，下列说法错误的是（ ） A．DNA连接酶和DNA聚合酶均能形成磷酸二酯键 B．DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段上 C．限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割RNA片段 D．限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，不会剪切自身的DNA 10．(高二下·江苏镇江六校等校联考·期末)某生物兴趣小组的同学用猪肝进行DNA的粗提取与鉴定实验，主要实验流程如下图。相关叙述不正确的是（ ）
A．为了方便对材料进行处理，也可以用新鲜猪血来代替猪肝用于DNA的粗提取 B．过程⑤加入酒精后，也可将溶液倒入离心管离心后取沉淀物 C．过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性 D．提取到的丝状物先溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴加热后变蓝 11．(高二下·贵州遵义区县一中·期末)培育转基因抗虫棉时，需要将Bt抗虫基因进行“切割”、改造和“拼接”；将重组DNA导入棉花细胞内并表达。下列有关基因工程叙述正确的是（ ） A．限制酶、RNA聚合酶可作用于DNA上的磷酸二酯键 B．T4DNA连接酶只能连接具有互补黏性末端的DNA片段 C．1种限制酶切割只有1个酶切位点的质粒时产生1个5′端 D．构建的基因表达载体上应具备启动子、终止子等调控元件 12．(高二下·四川绵阳·期末)图是家庭版DNA的粗提取的过程。若该实验得到的DNA鉴定效果不明显，则可能的原因不包括（ ）
A．实验所选用的材料中DNA含量较低 B．实验过程中酒精未预冷时，DNA被降解 C．粗提取的DNA中含有较多的杂质 D．鉴定时所用甲紫溶液失效，且未沸水浴加热 13．(高二下·重庆第一中学校·期末)蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，下图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1-4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述正确的是（ ）
A．若用限制酶从该DNA片段中直接切取蛛丝蛋白基因，则会破坏2个磷酸二酯键 B．若用PCR技术获取蛛丝蛋白基因，则设计的引物应分别结合在1、4部位 C．若以蜘蛛核DNA为模板，至少需经过6次循环才可以获得32个等长的蛛丝蛋白基因 D．利用凝胶电泳检测PCR产物时，需将产物与核酸染料混合以便实时观察电泳进程 14．(高二下·四川南充·期末)几种限制酶的识别序列及其切割位点（箭头表示）如下表所示。据表推测，下列叙述错误的是（ ） A．限制酶使特定核苷酸序列特定部位的磷酸二酯键断开 B．BamHⅠ和Bel Ⅰ识别的核苷酸序列都能被Sau3A Ⅰ识别 C．SmaⅠ切割DNA 片段后形成的黏性末端，可用E.coli DNA连接酶连接 D．BamHⅠ切割产生的DNA片段能与BelⅠ切割产生的DNA片段相连接 15．(高二下·吉林吉林永吉实验高级中学等校·期末)用Xho I和Sal I两种限制酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点均能切开）。酶切位点及酶切产物电泳结果分别如图1和图2所示。下列叙述错误的是（ ）
A．大多数限制酶的识别序列由6个核苷酸组成 B．解旋酶与图1中的两种限制酶均能催化氢键断裂 C．图2泳道②中可能是用Xho Ⅰ处理得到的酶切产物 D．用两种限制酶同时处理该DNA电泳后可得到6种条带 1．(高二下·河南天一大联考·期末)乙肝疫苗是通过基因工程将乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的基因导入酵母菌中表达，再利用发酵工程大规模生产获得的。已知HBsAg不能被酵母菌分泌到细胞外。下列相关叙述错误的是（ ） A．为了提高转基因的成功率，可以通过PCR技术扩增 B．可以利用抗HBsAg抗体在分子水平上检测 C．可利用酵母菌大量生产乙肝疫苗，在发酵之前需要对菌种进行扩大培养 D．发酵结束后从培养液中提取HBsAg，并对提取的HBsAg进行纯化、灭活 2．(高二下·陕西西安新城区·期末)为探究DNA片段P与O2蛋白结合的关键位点，研究者获得片段P不同位点的突变体M1、M2和M3，用O2蛋白进行结合试验，并用指示探针（带荧光的片段P）等进行检测，结果如图。下列分析错误的是（ ）
A．泳道2与泳道1相比较，条带2变窄 B．出现条带1是因为O2蛋白与指示探针结合 C．M2和M3与O2蛋白的结合强度相同 D．M1的突变位点几乎不影响O2蛋白的结合 3．(高二下·福建泉州鲤城区福建泉州第七中学·期末)将一段编码序列（CDS）插入到一个载体上，将该载体命名为pVN2024。如图A所示，将CDS插入到载体的SacⅡ位点，该位点位于lacZ基因的MCS区（含多个酶切位点），CDS的终止子上游0.8kb处有一个PstI的酶切位点。为确认CDS的大小和插入方向，科研人员用不同的限制酶切割重组质粒并进行电泳，结果如图B。下列叙述正确的是（ ）
（A图为载体示意图，方框内表示载体中限制酶识别位点）；（B图为不同限制酶切割产物的电泳示意图，M为标准电泳条带） A．SpeI酶切可用于判断CDS插入的方向 B．CDS插入时方向与lacZ基因的方向相同 C．CDS长度为2.6kb，在距一端0.5kb处有一个EcoRI识别位点 D．若重组质粒同时用EcoRI和SpeI酶切，电泳能检测到5个不同条带 4．(高二下·陕西渭南临渭区·期末)聚合酶链式反应（PCR）是一种分子生物学技术，通过模拟生物体内DNA的自然复制过程，在体外特异性地去复制特定的DNA片段，它的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。下列说法正确的是（ ） A．利用PCR技术获取目的基因，需要DNA聚合酶和DNA连接酶 B．PCR的每次循环包括复性、变性、延伸3个阶段 C．PCR利用了DNA热变性原理，通过调节温度控制PCR进程 D．复性时引物之间通过碱基互补配对结合 5．(高二下·山东东营·期末)研究发现，果聚蔗糖酶（LSase）第404位氨基酸与其热稳定性密切相关。为提升LSase的热稳定性，科研人员以野生型LSase基因为模板，设计引物改变LSase第404位氨基酸对应的碱基序列，实现对氨基酸的定点替换，相关流程如图所示。已知大肠杆菌含有20种合成蛋白质的氨基酸，F和R代表突变引物，DpnI能特异性的水解甲基化的DNA。下列说法错误的是（ ）
A．若要选出热稳定性最强的LSase，至少需要设计19对突变引物 B．推测混合处理是让质粒发生变性与复性，新合成的子链未甲基化 C．对突变质粒进行进一步扩增时，可继续使用突变引物F和R D．采用琼脂糖凝胶电泳技术不能区分出原始质粒与突变质粒 6．(高二下·山东德州·期末)利用生物技术培育新品种、制备生物产品时都需要进行筛选或检测。下列说法错误的是（ ） A．用发酵工程生产柠檬酸钠时，应采用过滤、沉淀等方法获得产品 B．用 96 孔板筛选杂交瘤细胞时，每个孔中尽量只接种一个细胞 C．培育乳腺生物反应器时，可用 PCR 检测目的基因是否转录出 mRNA D．用植物体细胞杂交培育作物新品种时，需对杂种细胞和杂种植株进行筛选 7．(高二下·福建福州福清·期末)PCR可看作生物体外特殊的DNA复制过程。如图为利用PCR技术扩增特定DNA片段的部分示意图，图中引物为单链DNA片段，它是子链延伸的基础。下列叙述正确的是（ ）
A．①为逆转录，核酸酶H可将杂交双链中的DNA水解，为PCR提供原料 B．PCR扩增时反应体系需加入模板、RNA引物、含Mg²⁺的缓冲液等成分 C．③为变性，使用90-95℃的高温处理是为断开引物与模板间形成的氢键 D．⑤为延伸，温度控制在70-75℃之间以提高相关酶活性，缩短延伸时间 8．(高二下·天津滨海新区·期末)如图为农杆菌转化法培育转基因抗病毒番茄植物的过程示意图，下列叙述错误的是（ ）
A．过程A需要限制酶和DNA连接酶的参与，可将重组质粒直接侵染植物细胞 B．过程B可用 C．抗病毒基因整合到番茄细胞的染色体DNA上需要借助T-DNA的转移 D．转基因抗病毒番茄植株是否培育成功可通过抗病毒接种实验进行鉴定 9．(高二下·四川眉山·期末)细菌和棉花对密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，将苏云金杆菌的 Bt 基因经改造后插入 Ti 质粒的 T—DNA 中构建基因表达载体，过程如下图所示。再用农杆菌转化获得了较强抗虫能力的抗虫棉。下列相关叙述错误的是（ ）
注：F1-F3, R1-R3表示引物；T-DNA-LB表示左边界；T-DNA-RB表示右边界；Ori表示复制原点；p35s为启动子；Kanr表示卡那霉素抗性基因；HygBr表示潮霉素B抗性基因。 A．用人工合成的1—1362基因序列替换天然序列利用了密码子的简并性 B．在筛选转化成功的细胞时，常用含有潮霉素B的培养基进行筛选 C．构建基因表达载体时插入两个p35s启动子能促进目的基因的表达 D．提取抗虫棉的基因组DNA利用PCR技术检测目的基因时应选择引物F1和R2 10．(高二下·河北邢台·期末)为提高水稻的产量，科研人员将EcCAT、OsGLO1、EcgCL*TSR与叶绿体转运肽基因连接，构建多基因表达载体，引导合成的蛋白质定向运输至叶绿体，从而在水稻叶绿体内构建了一条新的代谢途径。下列相关说法错误的是（ ）
A．EcCAT基因和OsGLO1基因以DNA的不同链为模板进行转录 B．不可利用卡那霉素筛选成功导入目的基因的水稻细胞 C．T-DNA插入水稻细胞质的DNA中可能会影响水稻自身基因的表达 D．为防止基因污染，可将外源α-淀粉酶基因与目的基因一起转入水稻 11．(高二下·四川达州普通高中·期末)天然β-淀粉酶耐热性较差，难以满足工业化生产需求。通过PCR对天然β-淀粉酶基因进行改造，将其导入大肠杆菌表达后，获得了一种耐高温的β-淀粉酶。与天然酶相比，改造后的酶在第476位发生了氨基酸替换，由天冬氨酸改变为天冬酰胺。下列叙述正确的是（ ） A．PCR技术在此过程中实现了对β-淀粉酶基因的定点突变 B．根据新的氨基酸序列可逆推出唯一对应的基因编码序列 C．对β-淀粉酶的改造实质是改变氨基酸的结构来改造功能 D．这种设计并合成耐高温的β-淀粉酶的技术属于基因工程 12．(高二下·四川南充·期末)病毒感染初期，机体会分泌干扰素并作用于细胞受体IF来应对感染。麻疹是由麻疹病毒感染引起的急性传染病。已知人白细胞分化抗原46（hCD46）是麻疹病毒入侵细胞的主要受体，小鼠没有该受体，科研人员构建hCD46转基因小鼠用于相关研究，部分流程如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．将hCD46基因接入质粒应选用限制酶EcoRⅠ和NotⅠ B．将重组质粒变为线性DNA应选用限制酶AgeⅠ和NotⅠ C．为获取大量胚胎用于移植，可用促性腺激素处理小鼠a，使其超数排卵 D．构建出的既表达hCD46又敲除IF基因的小鼠对麻疹病毒具有高易感性 13．(高二下·福建福州福建师大附中·期末)质粒P有2个EcoRI、1个SacI、1个BamH三种限制酶的酶切位点。BamH酶切位点位于两个EcoRI酶切位点正中间，以下是不同酶切产物的电泳图谱：泳道①是未酶切的质粒P电泳条带。②到④分别为三种酶单酶切质粒P产物的电泳条带，⑤到⑦为双酶切质粒P产物的条带。以下说法正确的是（ ）
A．电泳时片段移动方向是从正极到负极 B．图中②、③分别是SacI和EcoRI的酶切产物 C．泳道⑦为SacI和EcoRI酶切产物 D．泳道①②表明酶切后质粒P碱基数增大 14．(高二下·江西上进联考·期末)研究人员利用基因工程技术制备乳腺生物反应器生产某种药用蛋白，已知该药用蛋白基因的mRNA序列为5'-UUACUUCCUG··CAAGUUUCAU-3',经逆转录得到cDNA,在其两端添加限制酶识别序列后利用PCR技术扩增，将扩增后的DNA与启动子A等元件重组构建基因表达载体，如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．含该药用蛋白基因的启动子，构建基因表达载体前需将其去除 B．由于启动子A具有组织特异性，该药用蛋白基因只在乳腺细胞中表达 C．PCR扩增时两种引物分别是5'-GAATTCTTACTT-3'和5'-CTGCAGATGAAA-3' D．构建的基因表达载体还需通过显微注射的方法导入雌性动物的乳腺细胞中 1．(高二下·吉林长春长春汽车经济技术开发区第三中学·期末)现有甲、乙两不同物种的二倍体纯合植物，甲植物（2n=14）的光合产量高于乙植物，但乙植物（2n=20）更适宜在盐碱地种植（相关性状均由核基因控制）。现要利用甲、乙两种植物培育出高产、耐盐的植株。下列技术不可行的是（ ） A．两种植物杂交后，得到的F1再利用单倍体育种，可较快获得所需植株 B．将乙种植物耐盐基因导入甲种植物的体细胞中，可培育出具有耐盐性状的甲种植物 C．利用植物体细胞杂交技术，可以获得高产、耐盐的四倍体杂种植株 D．诱导两种植物的花粉融合后培育成幼苗，再用秋水仙素处理可培育出所需植株 2．(高二下·陕西西安南开高级中学·期末)继乳腺生物反应器之后，科学家又培育出膀胱生物反应器：将人的生长激素基因导入小鼠受精卵，经培育获得膀胱上皮细胞可以合成并分泌人的生长激素的转基因小鼠。下列有关叙述错误的是（ ） A．将人的生长激素基因导入小鼠受精卵，是因为受精卵具有全能性 B．需要在人的生长激素基因首端加上小鼠膀胱上皮细胞特异性启动子 C．与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制 D．用PCR技术可检测人的生长激素基因在小鼠细胞内是否转录和翻译 3．(高二下·广东东莞·期末)次生代谢产物X是某植物细胞在微生物侵害等胁迫过程中产生的防御物质，可用于药物生产。其研发流程为：筛选高产细胞→确定细胞生长和产物X合成的关系（如图）→大量生产X。下列叙述错误的是（ ）
A．应先培养大量细胞，后改变条件使细胞停止生长来大量生产X B．可将微生物菌体作为诱导因子加入培养基中，进而提高X产量 C．X的工厂化生产需要将高产植物的外植体培养成完整植株后提取 D．可以通过改造酵母菌等微生物的基因，利用发酵工程生产X 4．(高二下·四川南充·期末)研究者将抗虫融合基因cv与耐草甘膦基因ce构建在同一T-DNA中，并利用农杆菌转化法导入水稻细胞，培育出了抗虫耐除草剂的转基因水稻。下列叙错误的是（ ） A．农杆菌Ti质粒上的T-DNA，能整合到受体细胞的染色体DNA上 B．转基因水稻种植时可减少农药的使用，进而降低农药对环境的污染 C．将转基因水稻与普通水稻间行种植的主要目的是增加基因的多样性 D．转基因水稻获批上市后，必须严格实行标识制度，保证消费者的知情权 5．(高二下·吉林松原宁江区吉林油田高级中学·期末)下列生物技术操作不会达成预期目标的是（ ） A．将肠乳糖酶基因导入奶牛乳腺细胞，培育产低乳糖牛乳的奶牛 B．将胰岛素基因表达质粒转入酵母菌，筛选获得产胰岛素工程菌 C．将体外改造后能识别特定癌细胞的T细胞回输患者，进行癌症治疗 D．将花青素代谢相关基因导入植物体细胞，再经组织培养获得具有特定花色的植株 6．(高二下·河南开封·期末)为解决草莓品种抗虫性差和因病毒积累导致品种退化的问题，育种工作者进行了以下尝试：①利用草莓茎尖进行组织培养；②将草莓细胞与抗虫植物细胞进行体细胞杂交；③对草莓愈伤组织细胞进行液体悬浮培养。下列叙述错误的是（ ） A．①技术可以获得草莓脱毒苗 B．②技术的原理是细胞膜的流动性 C．③技术不能得到草莓新品种 D．用基因工程技术可培育抗虫品种 7．(高二下·湖北武汉重点中学5G联合体·期末)乳腺生物反应器是通过转基因技术，将外源基因导入动物（如牛、羊）基因组中，并使其在乳腺组织特异性表达，利用动物乳腺高效合成、分泌蛋白的能力，在乳汁中生产药用蛋白或其他高价值产品的生物技术体系。下列说法错误的是（ ） A．在构建基因表达载体时，要在外源基因序列上游加上能在乳腺中特异性表达的基因的启动子 B．与利用转基因大肠杆菌生产蛋白相比，乳腺生物反应器得到的蛋白活性更高 C．培育的转基因动物体内，只有乳腺组织细胞中才含有外源基因 D．乳腺生物反应器具有产量高、成本低、产品质量好和易提取等优点 8．(高二下·福建龙岩·期末)下列有关基因工程应用的说法，错误的是（ ） A．制造一种能降解石油的“超级细菌”属于基因工程的应用 B．将药用蛋白基因导入到动物乳腺细胞中，可培育出乳腺生物反应器 C．将必需氨基酸含量多的蛋白质基因导入农作物，提高农产品的品质 D．相比天然产物提取的酶，用基因工程技术获得的工业用酶纯度更高 9．(高二下·天津河北区·期末)采用基因工程技术培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成人凝血因子且只存在于乳汁中。下列说法正确的是（ ） A．该转基因羊无法将人凝血因子基因传递给后代 B．该转基因羊的所有细胞都含有人凝血因子基因并可以正常表达 C．与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制，受体来源更广泛 D．将含有人凝血因子基因的表达载体导入羊乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器 10．(高二下·广东深圳龙华区·期末)聚羟基丁酸酯（PHB）是一种可降解塑料，可由木质素转化合成。某研究团队将关键代谢基因整合到微生物基因组中，并对工程菌进行驯化和筛选，实现了木质素向PHB的高效转化。下列叙述正确的是（ ） A．木质素为工程菌提供碳源，无需添加其他营养物质 B．对工程菌进行的驯化和筛选是通过选择培养基实现的 C．关键代谢基因整合到微生物基因组实现了诱变育种 D．获得PHB的工程菌需要利用提取、分离和纯化等技术 11．(高二下·陕西西安新城区·期末)科学家们致力于通过基因工程手段解决各种医学和工业难题。下列关于基因工程技术应用的叙述，错误的是（ ） A．目前利用基因工程技术可以生产细胞因子、抗体和疫苗等 B．通过将肠乳糖酶导入到奶牛乳腺细胞中，以降低乳汁中乳糖含量，从而解决部分人群的乳糖不耐受问题 C．将来源于某些病毒、真菌的抗病基因导入植物中，可培育转基因抗病植物 D．利用基因工程菌来生产工业用酶的优点是酶纯度更高、生产成本显著降低、生产效率较高 12．(高二下·四川广元·期末)基因工程在农牧业、医药卫生和食品工业等方面展示出了广阔的应用前景。下列叙述错误的是（ ） A．我国转基因抗虫棉的成功培育，实现了基因由微生物向植物的定向转移 B．将肠乳糖酶基因导入奶牛乳腺细胞，可培育出产低乳糖牛乳的奶牛 C．通过构建基因工程菌，可利用发酵技术大量生产加工转化糖浆所需的淀粉酶 D．膀胱生物反应器优于乳腺生物反应器的方面包括不受性别、发育时期等限制 21．(高二下·山东菏泽·期末)蛛丝有超强韧性，科学家将蛛丝蛋白基因转入羊的受精卵中，获得乳腺生物反应器，在基因工程中可通过PCR技术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法错误的是（ ） A．PCR过程中为了减少非特异性扩增，可增加引物长度且适当降低复性温度 B．科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 C．在凝胶载样缓冲液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察 D．如果电泳结果显示羊体细胞中含有蛛丝蛋白基因，则其乳汁中含有蛛丝蛋白 22．(高二下·河北衡水枣强县枣强中学·期末)空军军医大学西京医院于2024年3月10日在世界上首次实施一例“基因编辑猪一人”异种肝移植手术，成功将一只多基因编辑猪的全肝移植到一位脑死亡患者体内，这为解决人体移植器官短缺的问题带来了曙光。下列叙述正确的是（ ） A．与猪相比，灵长类动物体内隐藏的、可导致人类疾病的病毒更少 B．基因改造的猪肝脏可能导入了某种调节因子抑制抗原决定基因的表达 C．基因改造过程中可能用到了限制酶、DNA聚合酶和DNA连接酶等 D．器官短缺和免疫排斥是目前制约人体器官移植的两大难题 23．(高二下·辽宁丹东·期末)水杨酸广泛应用于水体消毒，但使用过量会导致水生动物运动能力、繁殖能力和抵抗力降低，严重影响水生动物的产量。科学家利用基因工程构建智能工程菌，通过向大肠杆菌体内导入含特殊DNA序列的重组质粒，制备如图甲的水杨酸生物传感器，为环境污染治理提供新方法。请回答下列问题：
(1)除了限制酶外，构建重组质粒过程中还要用_______酶，图中启动子的作用是______。 (2)水杨酸羟化酶可催化水杨酸转化为可被细胞分解的龙胆酸，mrfp基因能表达产生红色荧光蛋白，为构建水杨酸羟化酶基因与mrfp基因的融合基因，在利用PCR技术分别获取水杨酸羟化酶基因与mrfp基因过程中，需要给图乙中的4种引物的_______端添加限制酶的识别序列，A、B 2种引物的末端应分别添加图甲中_______、_______限制酶的识别序列；C、D 2种引物的末端应分别添加图甲中_______、_______限制酶的识别序列。 (3)为检测水杨酸生物传感器对水杨酸的敏感程度，进行如下实验，结果如下表： 注：“+”数量越多表示荧光强度越高 研究小组选取成功导入重组质粒的大肠杆菌若干随机均分为甲、乙、丙三组，甲组培养环境为含较低浓度水杨酸的培养液，丙组的培养环境是_______，由该实验可推知，重组质粒中目的基因的表达程度受到环境中_______的调控。 (4)综上所述，成功导入重组质粒的大肠杆菌，可在环境治理中起到的作用是________。 24．(高二下·陕西安康·期末)血清白蛋白（HSA）是人体血浆中最主要的蛋白质，具有多种生物学功能。科学家对植物细胞进行基因改造，使它们能够生产HSA，基本技术流程如图所示，Ti质粒中报告基因表达的产物能催化无色物质K呈现蓝色。回答下列问题：
(1)为获取大量的HSA基因用于基因表达载体的构建，通常采用PCR技术对HSA基因进行扩增。PCR反应需要在一定的缓冲液中才能进行，缓冲液中一般需要添加Mg2+，其原因是________。PCR扩增前需要设置PCR仪的循环次数，每次循环可以分为________三步。 (2)组建重组Ti质粒的过程中需要用到的酶有________HSA基因需要插入Ti质粒中的________部位，原因是________。 (3)为检测转基因植物是否表达出HSA，可从转基因植物中提取蛋白质，用________的抗体进行抗原一抗体杂交；也可在所提取的蛋白溶液中加入无色物质K，若蛋白溶液呈现________，说明HSA基因翻译出蛋白质。 (4)科学家还利用乳腺生物反应器来批量生产HSA。科学家将HSA基因与在乳腺中特异表达的基因的__________等调控元件重组在一起，该操作的目的是________。 25．(高二下·内蒙古通辽科左中旗民族职专?实验高中·期末)人的血清蛋白（HSA）具有重要的医用价值，研究人员欲利用基因工程来大量生产HSA。图1为HSA基因片段和人工构建的大肠杆菌质粒pBR322，其中Amp表示氨苄青霉素抗性基因，Neo表示新霉素抗性基因，箭头表示切割形成末端完全不同的4种限制酶的切割位点。以基因工程技术获取重组HSA（rHSA）的三条途径如图2所示。请回答下列问题：
(1)据图1分析，在构建基因表达载体时，选择限制酶______切割质粒和目的基因，双酶切法的两个优点是______、______。 (2)为了排除普通受体细胞（未导入质粒）、空质粒受体细胞（导入pBR322质粒而非重组质粒）的干扰，目的基因导入后进行筛选，若筛选用甲、乙两种培养基，两种培养基的差异为______，含重组质粒的受体细胞在培养基上的生长情况为______。 (3)将农杆菌与水稻圆叶片进行共培养，旨在让Ti质粒的______进入水稻受体细胞。三种方法中，为检测目的基因的表达情况，均可提取受体细胞的蛋白质，用抗人血清蛋白（HSA）的抗体进行______实验。 (4)科学家培养出一种转基因羊，其膀胱上皮细胞可以合成人的血清蛋白并分泌到尿液中。其培育方法中将重组质粒通过______法导入山羊的______细胞。与“乳腺生物反应器”相比，“膀胱生物反应器”不受______限制，受体来源更广泛。 1．(高二下·河南天一大联考·期末)随着生物技术的飞速发展，生物技术的安全性与伦理问题日益受到关注。下列相关叙述正确的是（ ） ①基因编辑技术可能会引发“设计完美婴儿”等伦理争议，破坏人类遗传多样性 ②转基因作物的种植可能会导致基因污染，对生态环境造成潜在威胁 ③生殖性克隆人涉及伦理问题，而治疗性克隆不涉及伦理问题 ④生物武器具有传染性强、危害大等特点，被国际社会严格禁止 A．①②④ B．①②③ C．②③④ D．①③④ 2．(高二下·福建漳州第一中学·期末)下列关于生物技术的应用、安全性与伦理问题的叙述，错误的是（ ） A．大田种转基因抗虫棉时，间隔种植少量非转基因棉，以维持田间物种多样性 B．α-淀粉酶阻断淀粉储存使花粉失活，可将其基因与目的基因共转入植物，防止转基因花粉传播 C．我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验 D．任何国家都应严格禁止生产和使用生物武器 3．(高二下·吉林吉林永吉实验高级中学等校·期末)随着克隆羊“多莉”、克隆犬“龙龙”等克隆动物的不断出现，克隆人似乎离我们越来越近了。下列叙述错误的是（ ） A．生殖性克隆人的出现有可能破坏现有的家庭和社会结构 B．治疗性克隆是为了进行医学研究和治疗，仍需监管审查 C．虽然生殖性克隆人存在伦理问题，但克隆技术已经成熟 D．生殖性克隆和治疗性克隆属于无性繁殖，与试管婴儿原理不同 4．(高二下·福建泉州鲤城区福建泉州第七中学·期末)下列有关生物技术叙述正确的是（ ） A．转基因作物的长期、大规模种植不利于侵染力更强的害虫的出现 B．我国允许治疗性克隆的研究，但严禁任何形式的生殖性克隆人行为 C．只要有证据表明某种转基因食品有害，就应全面禁止转基因技术在食品上的应用 D．生物武器包括致病菌类、病毒类、毒品类、生化毒剂类等，能对动植物和人类造成严重危害 5．(高二下·浙江嘉兴·期末)2021年4月15日，《中华人民共和国生物安全法》正式实施，下列做法和分析符合生物安全法的是（ ） A．不发展、不生产生物武器 B．可以开展人类的生殖性克隆 C．转基因食品由于制作时已被灭活，无需风险评估 D．将目的基因转入叶绿体的农作物不影响周围物种 6．(高二下·黑龙江哈尔滨师范大学附属中学·期末)生物技术就像一把“双刃剑”，它既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。下列叙述错误的是（ ） A．我国保留生物武器的研发项目以应对国外生物武器及其技术和设备的威胁 B．干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，但也存在导致肿瘤发生的风险 C．研究转基因农作物时应采取多种方法防止转基因花粉的传播，避免基因污染 D．随着基因组编辑技术的发展，科学家可以在体内和体外对基因进行敲除、插入 7．(高二下·陕西西安新城区·期末)生物技术是一把双刃剑，它的发展既可以造福人类，同时也伴随着潜在的风险和挑战。下列有关叙述错误的是（ ） A．生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等 B．生物武器具有传染性强、攻击范围广等特点 C．治疗性克隆的目的是用于医学研究和治疗，无需监管审查 D．生殖性克隆涉及细胞核移植技术，我国政府不接受任何生殖性克隆人实验 8．(高二下·黑龙江绥化肇东第四中学校·期末)下列关于生物技术的安全性及伦理问题的观点，错误的是（ ） A．应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质 B．生殖性克隆人问题带来了巨大的伦理挑战 C．反对“设计试管婴儿”的原因之一是试管婴儿技术属于无性繁殖方式 D．生物武器具有传染性强、作用范围广等特点，应严格禁止 9．(高二下·河北衡水桃城区衡水第二中学·期末)转基因作物因其抗旱、抗寒、抗虫等能力而备受关注。下列关于转基因作物的叙述，错误的是（ ） A．转基因作物被食用后，其基因就整合到人的基因组中 B．种植的转基因作物可以与传统的农业种植区相隔离 C．可对转基因作物进行标识管理，让消费者有选择权 D．转基因作物的安全性涉及其是否会产生毒性或过敏蛋白 10．(高二下·四川绵阳外国语学校·期末)生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述合理的是（ ） A．我国允许用基因编辑技术对基因进行敲除、插入等，设计“完美试管婴儿” B．玉米的α-淀粉酶基因与目的基因一起转入植物可防止基因污染 C．转基因微生物制成的生物武器危害性大，应禁止，是因为人体不会对制造的新病毒产生免疫反应 D．生殖性克隆人能丰富人类基因的多样性，我国允许在特定人群中进行相关实验 11．(高二下·山东东营·期末)关于生物技术的安全性与伦理问题，下列说法错误的是（ ） A．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力 B．将α-淀粉酶基因转入植物中可防止转基因花粉的传播 C．生殖性克隆人研究不能丰富人类基因的多样性 D．应该运用科学的方法控制并合理使用生物技术 12．(高二下·浙江丽水·期末)生物技术安全和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是（ ） A．转基因作物上市前无需通过食品和环境安全评价 B．生物武器利用致病微生物、毒素等形成杀伤力 C．治疗性克隆可解决器官移植时的免疫排斥问题 D．设计试管婴儿技术可减少遗传病的发生概率 13．(高二下·江西丰城第九中学·期末)下列关于生物技术的安全性和伦理问题的叙述，正确的是（ ） A．只要有证据表明产品有害，就应该禁止转基因技术的应用 B．转基因植物的叶绿体基因组不会进入生殖细胞 C．通过基因编辑技术破坏受精卵中的 CCR5 基因，使婴儿天生抵抗艾滋病的做法，可能引发不可预知的后果 D．依据中国法律，在严格监管和伦理审查下，基因编辑技术不可用于治疗性克隆研究 14．(高二下·辽宁大连·期末)生物技术是把双刃剑，造福人类的同时也带来了安全性和伦理问题，人们必须高度重视。下列叙述正确的是（ ） A．从早期胚胎中提取ES细胞用于治疗白血病，并不及伦理问题 B．转基因作物可能通过花粉传播外源基因，进而引发基因污染问题 C．严禁借助体外受精技术筛选早期胚胎性别，设计试管婴儿 D．干细胞的研究具有广阔的应用前景，应大力发展、无需监管 15．(高二下·陕西西安西咸新区·期末)生物技术的进步在给人类带来福祉的同时，也带来了安全与伦理方面的挑战。下列叙述正确的是（ ） A．将目的基因导入叶绿体基因组可以有效地防止基因污染 B．生物武器是用病毒类、干扰素及生化毒剂类等来形成杀伤力的 C．生殖性克隆是为了获得治疗所需的克隆细胞，应给予一定支持 D．转基因农作物可能引起食品安全问题，但对生态环境没有影响 |
基因
基因的表达产物
处理农杆菌，使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态
